Fenolik bileşiklerin tayinine yönelik amperometrik esaslı biyosensör hazırlanması
Yükleniyor...
Dosyalar
Tarih
2009
Yazarlar
Dergi Başlığı
Dergi ISSN
Cilt Başlığı
Yayıncı
Erişim Hakkı
info:eu-repo/semantics/openAccess
Özet
Günümüzde fenolik bileşik tayininde çeşitli kromatografik, spektrofotometrik ve enzimatik yöntemler kullanılmaktadır. Ancak bunlar özel ekipmanlar gerektiren zaman alıcı sistemlerdir. Biyosensörler enzim, hücre ve doku gibi biyolojik unsurların uygun bir iletim sistemi ile birleştirilmesiyle oluşan biyoanalitik cihazlardır. Biyosensörlerin diğer yöntemlere karşı en önemli avantajı, tayin edilecek maddeler için ekonomik, pratik ve spesifik ölçümlere imkan vermesidir. Saf enzimleri içeren dokuların kullanılmasıyla hazırlanan doku temelli biyosensörler, saf enzimlerin immobilize edilmesiyle hazırlanan biyosensörlerle kıyaslandıklarında, oldukça ucuz, yüksek kararlılıklı ve yüksek aktiviteli tayin sistemlerini oluşturmaktadır. Bu çalışmada fenolik bileşikleri substrat olarak kullanan polifenoloksidaz enzimince zengin taze bakla ve Anamur muzu kabuğu bitki dokuları kullanılarak fenolik bileşik tayini için doku temelli biyosensörler geliştirilmiştir. Bu amaç doğrultusunda bitki dokuları, immobilizasyon materyali olarak jelatin ve çapraz bağlayıcı olarak glutaraldehitin kullanılmasıyla camsı karbon elektrot yüzeyinde immobilize edildi. Ölçümler, fenolik bileşik konsantrasyonu ile doğru orantılı olarak azalan akımın belirlenmesiyle elde edilen standart grafikler yardımıyla gerçekleştirildi. İmmobilizasyon ve çalışma koşullarının optimizasyonu için, optimum glutaraldehit yüzdesi, doku miktarı, jelatin miktarı, pH, tampon konsantrasyonu ve sıcaklık değerleri muz kabuğu biyosensörü için sırasıyla % 1.25, 7.96 mg/cm2 , 0.88 mg/cm2 , 7.0, 66 mM, 35 o C ve taze bakla biyosensörü için sırasıyla % 1.25, 10.60 mg/cm2 , 0.98 mg/cm2 , 7.0, 66 mM, 37.5 o C olarak bulundu. Bunun yanı sıra, her iki biyosensör için de 12 farklı fenolik bileşiğin tayin aralıkları kalibrasyon grafikleri ile elde edildi. Ayrıca biyosensörlerin depolama kararlılıkları ve tekrarlanabilirlikleri, inhibitör olabilecek bazı maddelerin etkileri araştırıldı. Muz kabuğu ve taze bakla biyosensörleri için kateşol lineer tayin aralıkları kalibrasyon grafiklerinden sırasıyla 10-80 µM ve 5-60 µM olarak bulundu. Biyosensörlerin standart sapma ve varyasyon katsayısı değerleri, muz kabuğu biyosensörü için 1.44x10-3, % 2.69 ve taze bakla biyosensörü için 0.64x10-3, % 1.59 olarak bulundu. Çalışmanın son kısmında çeşitli içecek örneklerinde fenolik bileşik miktarları standart ekleme metoduyla belirlendi.
Açıklama
Anahtar Kelimeler
Kimya
