Bitkisel toksine karşı monoklonal antikor üretimi ve karakterizasyonu
Yükleniyor...
Dosyalar
Tarih
2019
Yazarlar
Dergi Başlığı
Dergi ISSN
Cilt Başlığı
Yayıncı
Trakya Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü
Erişim Hakkı
info:eu-repo/semantics/embargoedAccess
Özet
Doğada bulunan bazı bitkiler oldukça zehirli olabilmektedir. En zehirli bitkilerden biri olan Afrika kökenli Hint yağı bitkisi otuzdan fazla ülkede üretilmekte ve yakıt ek maddesi, ilaç, makine yağı, süs bitkisi, kumaş kaplamalar, sabun, kozmetik gibi geniş bir endüstri alanında kullanılmaktadır. Bitkinin tohumundan yağın çıkarılmasından sonra elde edilen püre hayvan yemi, tohum kabukları da gübre olarak kullanılabilmektedir. Hint yağı bitkisinin tohumlarında %1-5 miktarlarında bulunan risin toksinine düşük dozlarda bile maruz kalındığında öldürücü bir etkiye neden olabilmektedir. Üretilen ürünlerin toksinden arındırılmamış olması veya yanlış kullanımlar zehirlenme ve ölümlere neden olabilmektedir. Bitki tohumlarından elde edilebilen risinin, kolay erişebilirliği ve yüksek toksisitesi nedeniyle halk sağlığı ve milli güvenlik açısından biyolojik tehdit potansiyeli bulunmaktadır. Sunulan bu tez çalışmasında ölümcül etkiye sahip bitkisel bir toksinin tespitinde kullanmak amacıyla monoklonal antikor geliştirilmesi amaçlanmıştır. Bu amaçla hint yağı bitkisinden elde edilen risin toksinine karşı hibridoma teknolojisini kullanarak spesifik monoklonal antikor geliştirme, geliştirilen antikorun laboratuvar ölçekte üretimi, saflaştırma ve karakterizasyon çalışmaları yürütülmüştür. Öncelikle immünojen olarak kullanılacak risin toksini toksoid formuna dönüştürülmüş, toksoid ile fareler immünize edilmiş, yüksek immün yanıt veren fareler ile yapılan füzyon çalışmaları sonucunda risin toksinini spesifik olarak tanıyan ve bağlanan monoklonal antikorlar üretilmiştir. Büyük miktarda ve saf olarak elde edilecek antikorlar, tıbbi alanda erken tanının sağlanması ve gıda alanında uygun içeriğin kontrolünde kullanılabilecek tanı testlerinin geliştirilmesine olanak sağlayacaktır. Yurt dışından temin edilen tanı testlerinin yerine ülkemizde geliştirilen yerli testlerin kullanımı ekonomik açıdan büyük yararlar sağlayacaktır.
Some plants found in nature can be quite toxic. One of the most poisonous plants of African origin, Indian castor oil is produced in more than thirty countries and is used in a wide range of industries such as fuel additives, pharmaceuticals, machinery oils, ornamental plants, fabric coatings, soaps and cosmetics. After the oil is obtained from the seed of the plant, the puree obtained as animal feed and seed shells can be used as fertilizer. It can cause a lethal effect even when exposed to low doses of ricin toxin which is present in 1-5% amounts of castor oil seeds. Improper use of the products produced or not toxin-free can lead to poisoning and death. The risk that can be obtained from plant seeds has the potential of biological threat to public health and national security due to its easy accessibility and high toxicity. In this thesis, it is aimed to develop monoclonal antibody in order to detect a lethal herbal toxin. For this purpose, specific monoclonal antibody development, laboratory scale production, purification and characterization studies were carried out using hybridoma technology against ricin toxin obtained from castor oil plant. First, the ricin toxin to be used as immunogen was converted to toxoid form, mice were immunized with toxoid, and fusion studies with high immune response mice produced monoclonal antibodies that specifically recognize and bind epitopes of the antigen. Antibodies to be obtained in large quantities and in pure form will enable the development of diagnostic tests that can be used in early studies in the medical field to ensure early diagnosis and control of appropriate content in the food field. The use of indigenous instead of testing the diagnostic tests are available abroad in Turkey to the development of these tests will provide economic benefits.
Some plants found in nature can be quite toxic. One of the most poisonous plants of African origin, Indian castor oil is produced in more than thirty countries and is used in a wide range of industries such as fuel additives, pharmaceuticals, machinery oils, ornamental plants, fabric coatings, soaps and cosmetics. After the oil is obtained from the seed of the plant, the puree obtained as animal feed and seed shells can be used as fertilizer. It can cause a lethal effect even when exposed to low doses of ricin toxin which is present in 1-5% amounts of castor oil seeds. Improper use of the products produced or not toxin-free can lead to poisoning and death. The risk that can be obtained from plant seeds has the potential of biological threat to public health and national security due to its easy accessibility and high toxicity. In this thesis, it is aimed to develop monoclonal antibody in order to detect a lethal herbal toxin. For this purpose, specific monoclonal antibody development, laboratory scale production, purification and characterization studies were carried out using hybridoma technology against ricin toxin obtained from castor oil plant. First, the ricin toxin to be used as immunogen was converted to toxoid form, mice were immunized with toxoid, and fusion studies with high immune response mice produced monoclonal antibodies that specifically recognize and bind epitopes of the antigen. Antibodies to be obtained in large quantities and in pure form will enable the development of diagnostic tests that can be used in early studies in the medical field to ensure early diagnosis and control of appropriate content in the food field. The use of indigenous instead of testing the diagnostic tests are available abroad in Turkey to the development of these tests will provide economic benefits.
Açıklama
Anahtar Kelimeler
Monoklonal antikor, Toksin, Hibridoma, Monoclonal antibody, plant toxin, Hybridoma
